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核酸提取儀的基本原理
發(fā)布時間:2023-04-28 09:22:20

核酸提取儀是應(yīng)用配套的核酸提取試劑來自動完成樣本核酸提取工作的儀器。 廣泛應(yīng)用在疾病控制中心、臨床疾病診斷、輸血安全、法醫(yī)學(xué)鑒定、環(huán)境微生物檢測、食品安全檢測、畜牧業(yè)和分子生物學(xué)研究等多種領(lǐng)域。

核酸提取儀的分類

1、根據(jù)儀器型號大小不同劃分 

1) 自動液體工作站

自動液體工作站是功能非常強大的設(shè)備,液體分液、吸液等自動完成,甚至能通過整合擴增、檢測等功能,實現(xiàn)標(biāo)本提取、擴增、檢測全自動化。

提取核酸只是其功能的一個應(yīng)用,不太適合常規(guī)實驗室提取核酸,一般都應(yīng)用在單一類標(biāo)本并且一次提取標(biāo)本量非常大的實驗需求上。自動工作站的平臺建立及平臺的運作,需要比較大的資金。

2) 小型自動核酸提取儀

小型的自動化儀器是通過運行結(jié)構(gòu)的特殊性來達(dá)到自動提取核酸的目的,可以在任何實驗室得到應(yīng)用。

2、根據(jù)提取原理不同劃分

1) 采用離心柱法的儀器

離心柱法核酸提取儀主要采用離心機和自動移液裝置相結(jié)合的方法,通量一般在1-12個樣本,操作時間和手工提取差不多,并不能提高實際工作效率,且價格昂貴,不同型號儀器的耗材也不能通用,僅適合經(jīng)費充足的大型實驗室使用。

2) 采用磁珠法的儀器

以磁珠為載體,利用磁珠在高鹽低PH值下吸附核酸,在低鹽高PH值下與核酸分離的原理,再通過移動磁珠或轉(zhuǎn)移液體來實現(xiàn)核酸的整個提取純化過程。

由于其原理的獨特性,所以可設(shè)計成很多種通量,既可以單管提取,也可以提取8-96個樣本,且其操作簡單快捷,提取96個樣本基本控制在15min以內(nèi),大大提高了實驗效率,且成本低廉,因而可以在不同實驗室使用,是目前市場上的主流儀器。

核酸提取儀的基本原理

1、抽吸法:也叫移液法,是通過固定磁珠、轉(zhuǎn)移液體來實現(xiàn)核酸的提取,一般通過操作系統(tǒng)控制機械臂來實現(xiàn)轉(zhuǎn)移。

提取過程如下:

1) 裂解:在樣品中加入裂解液,通過機械運動及加熱實現(xiàn)反應(yīng)液的混勻及充分反應(yīng),細(xì)胞裂解,釋放核酸。

2) 吸附:在樣品裂解液中加入磁珠,充分混勻,利用磁珠在高鹽低PH值下對核酸具有很強親和力的特點,吸附核酸,在外加磁場作用下,磁珠與溶液分離,利用吸頭將液體移出棄至廢液槽,吸頭棄掉。

3) 洗滌:撤去外加磁場,換用新吸頭加入洗滌緩沖液,充分混勻,去除雜質(zhì),在外加磁場作用下,將液體移出。

4) 洗脫:撤去外加磁場,換用新吸頭加入洗脫緩沖液,充分混勻,結(jié)合的核酸即與磁珠分離,從而得到純化的核酸。

2、磁棒法:通過固定液體,轉(zhuǎn)移磁珠來實現(xiàn)核酸的分離,原理和過程與抽吸法的一樣,不同的是磁珠和液體分離的方式。磁棒法是通過磁棒對磁珠的吸附將磁珠從廢液中分離開,放入下一步的液體中,實現(xiàn)核酸的提取。


(文章來源于互聯(lián)網(wǎng))

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